二氧化碳培養(yǎng)箱如何加濕及水盤污染控制問題？

更新時間：2015-09-14

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　細(xì)胞培養(yǎng)所需的條件：37度的溫度；5%二氧化碳濃度；環(huán)境濕度大于95%；溫度可以通過PID控制；二氧化碳濃度可以通過紅外傳感器進行控制，該怎樣控制濕度呢？

　　二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)通常采用兩種方式控制箱體內(nèi)濕度。一是采用被動控濕法，即通常的二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)均放置一個3L的水盤，內(nèi)盛3L無菌純水，37度的溫度，水自然蒸發(fā)，使箱體內(nèi)濕度達到95%。二是一些的二氧化碳培養(yǎng)箱，采用主動加濕系統(tǒng)(蒸汽發(fā)生器，加熱水盤，噴霧器等)，可以控制箱體內(nèi)的濕度，如低溫培養(yǎng)時（低溫二氧化碳培養(yǎng)箱）就需要主動加濕的方法。

　　水盤污染控制問題：這種高濕度條件下，放置在箱體內(nèi)部的水盤中的純凈水，很容易造成微生物的滋生，產(chǎn)生污染，導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)*失敗。

　　目前，控制水盤內(nèi)污染的方法有如下幾種：
　　1、定期(至少每兩周一次)，更換水盤內(nèi)的無菌蒸餾水或無菌去離子水。
　　2、在水盤內(nèi)添加適量硫酸銅，配制方法：20g無水硫酸銅＋5ml濃硫酸＋1L滅菌純水。
　　3、夏季氣溫高時，水盤里加0.02％的疊氮鈉可以有效的預(yù)防真菌污染。
　　4、水盤內(nèi)添加適量抗生素。
　　5、定期為培養(yǎng)箱(含水盤)進行一次高溫滅菌。
　　6、使用的水盤污染控制試劑，如市面上有些CO2培養(yǎng)箱廠家提供水盤污染控制的銀離子消毒盒，說明書上描述能有效殺滅600中微生物，能持續(xù)使用6個月，但此類污染控制試劑較常規(guī)方法，存在價格較昂貴缺點。采用主動加濕的方式就不存在污染問題。